试运行主要是按试验大纲要求，原则上利用不少于一个月的时间，进行列车运行图参数测试、故障模拟、应急救援演练、按图行车试验等项目测试，模拟线路正式运营状态，对高铁运输组织、列车接发、开行密度、设备状态等方面进行的一次全面“实战”检测，为正式开通运营提供科学依据。试运行使用的列车采用运营动车组担当爱的新生泰剧，沿途各站模拟办理客运业务。
沪苏湖高铁于2020年6月开工爱的新生泰剧，2024年6月全线铺轨贯通，8月开始静态验收，9月开始联调联试。自联调联试以来，检测列车、综合检测列车、重联动车组等先后上线，以不同速度等级进行往返检测试验以及全线拉通试验，共开行各类试验列车775列，检测总里程达52463公里，综合检测列车试验最高时速达385公里，安全、优质、高效完成了各项联调联试检测任务。沪苏湖高铁试运行将持续1个月左右时间，预计12月底具备开通运营条件。
“沪苏湖高铁开通后，将大大方便我们苏州吴江人的出行。”上海客运段高铁四车队列车员王晓君是江苏省苏州市吴江区人爱的新生泰剧，她告诉澎湃新闻记者，现在吴江人长途出行主要是自驾，还有乘坐客运大巴，地铁开通后，需要先乘坐地铁再转高铁，“现在吴江人如果去上海虹桥站，地铁加高铁要近3个小时，也不方便”。“（沪苏湖高铁开通后）苏州南站离吴江自驾20分钟，坐上高铁也就20-30分钟就能到达上海虹桥站了，不论是到上海，还是到苏州周边城市都会方便很多。”王晓君说。
沪苏湖高铁是上海、苏州、湖州基础设施互联互通的重大项目，也是长三角高铁联网、补网、强链的重点项目。建成运营后，将进一步优化上海铁路枢纽布局，完善区域路网布局，有效疏解沪宁、沪杭铁路通道运输压力，便利沿线人民群众出行，对于打造“轨道上的长三角”、促进沿线经济社会发展和长三角一体化高质量发展等具有重要意义。